Manipulation et Organisation de l'ADN Bactérien

📋 Plan du Cours

1. ADN recombinant
2. Enzymes de restriction
3. Clonage moléculaire
4. Vecteurs de clonage
5. Techniques de biologie moléculaire
6. Génétique inverse
7. Applications thérapeutiques
8. Organisation génétique bactérienne

📖 1. ADN recombinant

🔑 Notions clés & Définitions

• ADN recombinant : Molécule d'ADN modifiée pour inclure des séquences génétiques provenant de sources différentes, obtenue par insertion d’un fragment d’ADN étranger dans une molécule vectrice grâce à des enzymes de biologie moléculaire.
• Enzymes de restriction : Endonucléases bactériennes qui coupent l’ADN à des séquences spécifiques (4 à 6 paires de bases), permettant de générer des fragments cohésifs ou francs. Elles sont essentielles pour le clonage et la cartographie génétique.
• Vecteurs : Molécules d’ADN (plasmides, phages, YAC, BAC) permettant de transporter, cloner ou exprimer des gènes étrangers dans une cellule hôte. Leur choix dépend de la taille du fragment à cloner.
• Clonage moléculaire : Technique consistant à insérer un fragment d’ADN dans un vecteur, puis à introduire ce vecteur dans une cellule hôte pour produire en grande quantité le fragment d’intérêt.
• Transformation : Processus d’introduction d’un vecteur recombiné dans une cellule hôte (procaryote ou eucaryote), permettant la réplication et la sélection des clones porteurs du fragment d’ADN inséré.
• Système blanc/bleu : Méthode de sélection utilisant la enzyme…