Chromatographie d’exclusion — définition ?
Séparation basée sur la taille et la forme des molécules.
Phase stationnaire poreuse — rôle ?
Séparer selon la taille et la forme des protéines.
Séparation taille forme — principe ?
Différenciation par capacité à pénétrer dans les pores.
Volume d’élution — signification ?
Volume à partir duquel une molécule est évacuée.
Limites de fractionnement — importance ?
Définissent la gamme efficace de séparation.
Applications purification — exemples ?
Dépistage, dessalage, estimation de masse.
Constante Kav — formule ?
(Ve - Vo) / (Vt - Vo)
Gels de biopolymères — exemples ?
Dextrane (Sephadex), agarose (Sepharose).
Relation volume masse — formule ?
log(MM) = a – b × Ve
Résolution chromatographique — critère ?
R ≥ 1,5 pour bonne séparation.
Efficacité colonne — indicateur ?
Nombre de plateaux N.
Hauteur plateau HEPT — définition ?
L / N, mesure de finesse de séparation.
Chromatographie d’exclusion — principe clé ?
Séparation selon la taille et la forme.
Phase stationnaire poreuse — composition ?
Billies en gels de dextrane ou agarose.
Volume interstitiel (Vi) — localisation ?
Volume hors des pores, dans la phase mobile.
Volume poreux (Vp) — localisation ?
Volume à l’intérieur des pores.
Relation Ve - Vi = ?
Vo ou Vm, volume mort.
Limite supérieure de fractionnement — définition ?
Masse moléculaire au-delà de laquelle protéines sont exclues.
Limite inférieure de fractionnement — définition ?
Masse moléculaire en dessous de laquelle protéines pénètrent tout le volume.
Gamme de fractionnement — rôle ?
Définir la plage efficace de séparation.
Applications purification — principe ?
Différences de propriétés physiques ou chimiques.
Constante Kav — utilisation ?
Caractériser la taille et la forme des protéines.
Gels de biopolymères — caractéristique clé ?
Diamètre de pores, domaine de fractionnement.
Relation log MM = a – b x Ve — utilité ?
Estimer la masse moléculaire à partir de Ve.
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1. Qu'est-ce que la chromatographie d’exclusion ?
2. De quels matériaux sont principalement constituées les billes poreuses de la phase stationnaire en chromatographie d'exclusion décrite dans le contenu ?
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