Culture cellulaire — conditions ?
37°C, humidité, CO2 contrôlé
Indice de viabilité — formule ?
(cellules viables / total) × 100
Viabilité cellulaire — fonctions ?
Activité enzymatique, perméabilité, ATP, adhésion, NADPH, absorption
Test d’exclusion — principe ?
Colorant pénètre cellules mortes, pas viables
Bleu de Trypan — utilisation ?
Compter cellules vivantes/mortes par coloration bleue
MTT — produit et lecture ?
Formazan, DO à 570 nm après solubilisation
XTT — différence avec MTT ?
Formazan soluble, DO 490/650 nm, sans étape de solubilisation
LDH — marqueur ?
Libérée lors de désorganisation membranaire, dans le surnageant
SRB — principe ?
Fixation aux protéines, mesure à 510 nm
Dosage fluorimétrique — exemple ?
Résazurine (bleu→resorufine), diacétate de fluorescéine (vert)
Dosage luminescence — principe ?
ATP + luciférase → lumière, reflète la quantité cellulaire
Cytométrie flux — utilisation ?
Analyse individuelle, viabilité (FDA/IP), prolifération
Prolifération — méthode [3H]-TdR ?
Incorporation dans l’ADN en phase S, puis mesure radioactivité
Prolifération — méthode BrdU ?
Incorporation dans l’ADN, détection par anticorps anti-BrdU, non radioactive.
Test your knowledge with 14 questions on Évaluation de la Viabilité et Prolifération Cellulaire.
1. Que permet d’estimer la cytométrie en flux dans une analyse de prolifération avec CFSE ?
2. Quelle combinaison de paramètres correspond aux conditions standard d’un incubateur pour la culture de cellules animales ?
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