Flashcards: Techniques de purification des protéines — 14 cards

Purification des protéines — objectif ?

Isoler une protéine spécifique d’un mélange.

Source protéique — choix ?

Dépend de la concentration naturelle dans le tissu.

Lyse cellulaire — méthode mécanique ?

Homogénéisation pour libérer le contenu cellulaire.

Dénaturation — éviter ?

Utiliser des détergents doux, éviter SDS.

Stabilisation — température optimale ?

4°C pour limiter la dénaturation.

Protéines — détection ?

Western blot, ELISA ou activité enzymatique.

Propriétés physicochimiques — exploitation ?

Charge, polarité, taille pour la purification.

Chromatographie sur colonne — principe ?

Différence d’affinité entre phases mobile et stationnaire.

Phase stationnaire — support ?

Billes de silice, agarose ou cellulose.

Coefficient de partage — symbole ?

K, indique la répartition entre phases.

Filtration sur gel — molécules retenues ?

Taille supérieure au diamètre des pores.

Kav — définition ?

Paramètre de diffusion dans la filtration sur gel.

Chromatographie d’échange — séparation ?

Selon charge ionique des protéines.

Volume mort — rôle ?

Volume de phase mobile non retenu, élué en premier.