Techniques de séparation et séquençage des biomolécules

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Plan du Cours

  1. Solubilité et précipitation des protéines
  2. Dialyse et séparation par membranes
  3. Chromatographies des protéines et Rf
  4. Électrophorèse des protéines et SDS-PAGE
  5. Électrophorèse et blotting des acides nucléiques
  6. Focalisation isoélectrique et électrophorèse bidimensionnelle
  7. Séquençage des protéines et spectrométrie de masse
  8. Séquençage de l ADN et de l ARN

1. Solubilité et précipitation des protéines

Notions clés & Définitions

  • Force ionique : La force ionique décrit l’intensité des interactions électrostatiques dues à la concentration en sels dans une solution.
  • Salting-out : Le salting-out est une précipitation des protéines provoquée par l’augmentation de la concentration en sel, qui diminue leur solubilité.
  • pH : Le pH influence l’état de protonation des protéines et donc leur charge, ce qui modifie leur solubilité.
  • Charge des protéines : La charge des protéines correspond à la somme des charges portées par les groupements ionisables, déterminant leurs interactions avec le solvant.

Points essentiels

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1. Quel phénomène explique la précipitation progressive de protéines quand la concentration en sulfate d’ammonium augmente ?

2. Quel paramètre modifie la charge nette des protéines et influence ainsi leur solubilité en solution ?

3. Quel est le rôle principal d’une membrane semi-perméable en dialyse ?

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Flashcards preview

Solubilité protéines — influence ?

Force ionique, pH, charge

Salting-out — mécanisme ?

Précipitation par augmentation du sel

pH — effet sur protéines ?

Modifie leur charge et solubilité

Dialyse — principe ?

Séparation par membrane semi-perméable

Membrane semi-perméable — rôle ?

Laisse passer petites molécules, retient protéines

Chromatographie papier — séparation ?

Selon polarité, affinité, solubilité

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Frequently asked questions

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