Culture cellulaire — conditions ?
37°C, humidité, CO2 contrôlé
Indice de viabilité — formule ?
(cellules viables / total) × 100
Viabilité cellulaire — fonctions ?
Activité enzymatique, perméabilité, ATP, adhésion, NADPH, absorption
Test d’exclusion — principe ?
Colorant pénètre cellules mortes, pas viables
Bleu de Trypan — utilisation ?
Compter cellules vivantes/mortes par coloration bleue
MTT — produit et lecture ?
Formazan, DO à 570 nm après solubilisation
XTT — différence avec MTT ?
Formazan soluble, DO 490/650 nm, sans étape de solubilisation
LDH — marqueur ?
Libérée lors de désorganisation membranaire, dans le surnageant
SRB — principe ?
Fixation aux protéines, mesure à 510 nm
Dosage fluorimétrique — exemple ?
Résazurine (bleu→resorufine), diacétate de fluorescéine (vert)
Dosage luminescence — principe ?
ATP + luciférase → lumière, reflète la quantité cellulaire
Cytométrie flux — utilisation ?
Analyse individuelle, viabilité (FDA/IP), prolifération
Prolifération — méthode [3H]-TdR ?
Incorporation dans l’ADN en phase S, puis mesure radioactivité
Prolifération — méthode BrdU ?
Incorporation dans l’ADN, détection par anticorps anti-BrdU, non radioactive.
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1. Que permet d’estimer la cytométrie en flux dans une analyse de prolifération avec CFSE ?
2. Quelle combinaison de paramètres correspond aux conditions standard d’un incubateur pour la culture de cellules animales ?
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