Flashcards: Analyse et quantification des hexoses et acides aminés dans la glycoprotéine — 20 cards

Dosage hexoses neutres — principe ?

Hydrolyse acide, réaction avec orcinol, spectrophotométrie à 510 nm

Solution étalon — composition ?

Galactose et mannose, diluée au 1/10, 0,195 g/L

Préparation des tubes — étape clé ?

Respect des volumes précis pour reproductibilité

Chauffage en laboratoire — température ?

80°C pendant 20 min

Lecture spectrophotomètre — longueur d'onde ?

510 nm pour hexoses, 570 nm pour acides aminés

Calcul concentration finale — formule ?

C = C étalon × (DO échantillon / DO étalon) × facteur de dilution

Pourcentage d’hexoses — formule ?

(C hexoses / C protéines) × 100

Hydrolyse des protéines — agent ?

HCl 6N, chauffé à chaud

Réaction avec ninhydrine — produit ?

Coloration violette/pourpre, mesure à 570 nm

Construction courbe d’étalonnage — axes ?

X: quantité de leucine, Y: DO

Calcul acides aminés — étape ?

Conversion de DO en µmol, puis en g/L

Rendement d’hydrolyse — formule ?

(Acides aminés libérés / protéines initiales) × 100

Solution étalon hexoses — composition ?

130 mg galactose, 65 mg mannose, 100 mL

Dilution étalon — facteur ?

1/10

Préparation tubes — volume précis ?

Volumes exacts pour chaque réactif et échantillon

Procédure hydrolyse — étape essentielle ?

Chauffage à 80°C, puis refroidissement

Correction spectro — pourquoi ?

Pour éliminer interférences, assurer précision

Courbe d’étalonnage — utilité ?

Interpéter DO pour acides aminés

Calcul acides aminés — unité ?

µmol ou g/L, à partir de DO

Rendement hydrolyse — objectif ?

Évaluer efficacité de la rupture peptidique